آزمایش Metamycoplasma hominis, Molecular Detection, PCR, Varies

الگوریتم آزمایش:

• برای اطلاعات بیشتر، به تشخیص اندوکاردیت عفونی: آزمایش‌های تشخیصی برای شناسایی علت میکروبی مراجعه کنید.

نوع نمونه:

• متغیر

اطلاعات ضروری:

• مشخص کردن منبع نمونه الزامی است.

سوالات مرتبط با سفارش:

شناسه سوال	توضیحات
SRC86	منبع نمونه

نیازمندی‌های نمونه:

به دلیل حساسیت بالای روش تقویت‌شده توسط PCR، نمونه باید در محیطی پردازش شود که احتمال آلودگی با DNA مایکوپلاسما هومینیس حداقل باشد.

ارسال تنها یکی از نمونه‌های زیر مجاز است:

• نوع نمونه: سواپ
• ظرف/لوله:
  • ترجیحی: سیستم حمل‌ونقل کشت با سواپ داگرون یا ریون و شفت آلومینیومی یا پلاستیکی با محیط استوارت یا آمیز
  • قابل قبول: محیط‌های انتقال M4، M4-RT، M5، M6، محیط انتقال جهانی یا ESwab
• حجم نمونه: ۱ سواپ

• نوع نمونه: مایع
• منابع: مایع لگنی، صفاقی، آمنیوتیک، ترشحات پروستات، مایع تولیدمثلی، پلورال، قفسه سینه، پریکاردیال
• ظرف/لوله: ظرف استریل
• حجم نمونه: ۱ تا ۲ میلی‌لیتر

• نوع نمونه: تنفسی
• منابع: خلط، ترشحات نای، شستشوی برونشی، BAL، ریه؛ یا شستشوی بینی (فقط برای نوزادان زیر ۳ ماه)
• ظرف/لوله: ظرف استریل
• حجم نمونه: ۱ تا ۲ میلی‌لیتر

• نوع نمونه: مایع مفصلی
• ظرف/لوله:
  • ترجیحی: لوله بنفش (EDTA)
  • قابل قبول: لوله صورتی (EDTA)، لوله آبی سلطنتی (EDTA)، ویال استریل با نمونه EDTA، لوله قرمز بدون ضدانعقاد، ظرف استریل
• حجم نمونه: ۰.۵ میلی‌لیتر

• نوع نمونه: ادرار (اولین دفع)، سنگ کلیه/مثانه، حالب
• ظرف/لوله: ظرف استریل
• حجم نمونه: ۱۰ میلی‌لیتر یا کل نمونه
• دستورالعمل جمع‌آوری: نمونه اولین دفع می‌تواند در هر زمان از روز جمع‌آوری شود. بیمار نباید حداقل ۱ ساعت قبل از جمع‌آوری ادرار کرده باشد. نمونه اولیه باید ۲۰ تا ۳۰ میلی‌لیتر اول جریان ادرار باشد و بدون شستشوی مجرای ادراری گرفته شود.

• نوع نمونه: بافت
• منابع: جفت، محصولات بارداری، مجاری ادراری-تناسلی، دستگاه تنفسی، برونش، قفسه سینه، مدیاستین، استخوان، ستون فقرات، مفصل
• ظرف/لوله: ظرف استریل
• حجم نمونه: ۵ میلی‌متر مکعب
• دستورالعمل جمع‌آوری:
  • نمونه بافت تازه جمع‌آوری شود.
  • فقط بافت تازه ارسال شود؛ مایع به نمونه اضافه نشود.
  • نمونه در یخچال یا فریزر نگهداری شود.

دستورالعمل‌های ویژه:

• برای اطلاعات بیشتر، به تشخیص اندوکاردیت عفونی: آزمایش‌های تشخیصی برای شناسایی علت میکروبی مراجعه کنید.

فرم‌ها:

• در صورت عدم سفارش الکترونیکی، فرم درخواست آزمایش میکروبیولوژی (T244) را تکمیل، چاپ و همراه نمونه ارسال کنید.

حداقل حجم نمونه:

• مایع: ۱ میلی‌لیتر
• ادرار (اولین دفع): ۲ میلی‌لیتر
• سواپ: ۱ سواپ
• بافت: ۵ میلی‌متر مکعب

دلایل رد نمونه:

• سواپ‌های نوک‌دار پنبه‌ای یا کلسیم آلژینات
• سواپ‌های دارای شفت چوبی
• سواپ‌های حمل‌ونقل حاوی ژل یا زغال
• بافت‌های فیکس‌شده در فرمالین یا پارافین
• لوله Port-a-Cul
• ویال‌های مایع بی‌هوازی
• سواپ خشک (بدون ماده انتقال‌دهنده)
• مغز استخوان
• استخوان دکلسیمینه‌شده
• اسلایدهای شیشه‌ای
• نمونه‌های مایع تنفسی یا بدنی قرار داده‌شده در محیط انتقال ویروسی (VTM)

اطلاعات پایداری نمونه:

نوع نمونه	دمای نگهداری	مدت زمان
متغیر	یخچال (ترجیحی)	۷ روز
متغیر	فریزر	۷ روز

کاربردها:

• تشخیص سریع، حساس و اختصاصی Metamycoplasma hominis در نمونه‌های مختلف از جمله:
• مایع مفصلی
• نمونه‌های مجاری ادراری-تناسلی
• نمونه‌های دستگاه تولیدمثل
• نمونه‌های دستگاه تنفسی تحتانی
• مایع پلور / مایع قفسه سینه
• مایع پریکاردیال
• نمونه‌های زخم

ملاحظات:

• این آزمایش برای استفاده در پرونده‌های قانونی پزشکی (medicolegal) طراحی نشده است.

الگوریتم آزمایش:

• برای اطلاعات بیشتر، به تشخیص اندوکاردیت عفونی: آزمایش‌های تشخیصی برای شناسایی علت میکروبی مراجعه کنید.

اطلاعات بالینی:

Metamycoplasma hominis (نام پیشین: Mycoplasma hominis) با تعدادی از عفونت‌های بالینی مرتبط است، هرچند که بخشی از فلور طبیعی مجاری تناسلی محسوب می‌شود.

• M. hominis ممکن است در نمونه‌های تنفسی و مایع مغزی-نخاعی نوزادان یافت شود. با این حال، اهمیت بالینی آن نامشخص است، زیرا در برخی موارد بهبودی خودبخود رخ می‌دهد. در نوزادان نارس، این ارگانیسم با مننگوانسفالیت گزارش شده است.
• M. hominis ممکن است در برخی موارد بیماری التهابی لگن (PID) نقش داشته باشد که معمولاً همراه با سایر عوامل بیماری‌زا است.
• در مایع آمنیوتیک زنان مبتلا به زایمان زودرس، پارگی زودرس کیسه آب، زایمان خودبخود یا کوریوآمنیونیت یافت شده است. همچنین شواهدی وجود دارد که نشان می‌دهد این ارگانیسم می‌تواند با تب پس از زایمان یا تب ناشی از سقط جنین مرتبط باشد.
• M. hominis به‌ندرت با آرتریت سپتیک (شامل عفونت مفصل مصنوعی)، پیلونفریت، عفونت داخل شکمی، عفونت زخم، اندوکاردیت، عفونت‌های سیستم عصبی مرکزی (از جمله مننگوانسفالیت، آبسه مغزی، عفونت شنت مغزی و آمپیمای ساب دورال)، پنومونی، و افیوژن‌های عفونی پلور و پریکاردیال مرتبط بوده است.
• عفونت‌های خارج‌تناسلی معمولاً در افراد دارای **هایپوگاماگلوبولینمی** یا **نقص ایمنی سلولی** دیده می‌شود. در دریافت‌کنندگان پیوند ریه، این ارگانیسم با **پلوریت و مدیاستینیت** مرتبط بوده است. شواهد جدید نشان می‌دهد که در برخی از موارد عفونت‌های ناشی از M. hominis در گیرندگان پیوند ریه، انتقال از طریق **اهداکننده عضو** رخ داده است.

مزایای روش PCR:

• روش PCR دارای حساسیت و اختصاصیت بالا بوده و امکان **تشخیص سریع در همان روز** را فراهم می‌کند.
• این باکتری گاهی اوقات در کشت‌های معمول قابل تشخیص است، اما این روش نه **سریع** و نه **حساس** است.
• کشت‌های تخصصی وقت‌گیرتر از روش PCR هستند، بنابراین کلینیک مایو روش PCR را جایگزین کشت‌های معمولی برای شناسایی M. hominis کرده است.

مقادیر مرجع:

• قابل اعمال نیست

تفسیر نتایج:

• نتیجه **مثبت** PCR نشان‌دهنده حضور DNA متعلق به Metamycoplasma hominis در نمونه است.
• نتیجه **منفی** نشان‌دهنده عدم شناسایی DNA این ارگانیسم است، اما نمی‌تواند عفونت را به‌طور کامل رد کند. **نتایج منفی کاذب** ممکن است به دلایل زیر رخ دهد:
• وجود مهارکننده‌های PCR در نمونه
• تغییرات ژنتیکی در نواحی پرایمر و پروب
• تعداد بسیار کم M. hominis در حدی که زیر سطح تشخیص آزمایش باشد

موارد احتیاط:

• مواد تداخل‌کننده ممکن است بر دقت این آزمایش تأثیر بگذارند. **تفسیر نتایج باید همراه با بررسی بالینی و اپیدمیولوژیکی بیمار انجام شود**.
• از آنجا که Metamycoplasma hominis بخشی از فلور طبیعی برخی از افراد است، نتایج مثبت باید **متناسب با شرایط بالینی بیمار** تفسیر شود.
• این آزمایش سایر گونه‌های Metamycoplasma یا Ureaplasma (مانند Metamycoplasma pneumoniae که عامل شایع پنومونی اکتسابی جامعه است) را شناسایی نمی‌کند.

منابع بالینی:

1. Sampath R, Patel R, Cunningham SA, et al. Mycoplasma hominis در گیرندگان پیوند قلب و ریه: عفونت نادر با احتمال انتقال از اهداکننده. EBioMedicine. 2017;19:84-90.
2. Waites KB, Bebear C. Mycoplasma و Ureaplasma. در: Carroll KC, Pfaller MA, ویراستاران. راهنمای میکروبیولوژی بالینی. نسخه 12. ASM Press; 2019:1117-1136.

توضیحات روش:

این روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) از یک سیستم تشخیص اختصاصی شامل **پرایمرها** و **پروب‌های هیبریداسیون FRET** طراحی‌شده برای ژن tuf در Metamycoplasma hominis استفاده می‌کند.

دستگاه LightCycler توالی‌های اسید نوکلئیک هدف را در طول چرخه‌های PCR **تقویت و پایش** می‌کند. این سیستم PCR خودکار به‌سرعت محصول تقویت‌شده را شناسایی می‌کند.

مکانیسم تشخیص:

• شناسایی محصولات PCR بر اساس **اصل FRET** انجام می‌شود.
• در روش FRET، یک **پروب هیبریداسیون** حاوی **فلوئوروفور دهنده (fluorescein)** در انتهای 3’، توسط یک منبع نوری خارجی تحریک می‌شود.
• نور منتشر شده توسط پروب دهنده، توسط پروب دوم حاوی **فلوئوروفور گیرنده (LC-Red 640)** در انتهای 5′ جذب می‌شود.
• فلوئوروفور گیرنده سپس نوری با طول‌موج متفاوت منتشر می‌کند که اندازه‌گیری می‌شود. شدت سیگنال منتشرشده **متناسب با میزان محصول PCR اختصاصی** است.
• این فرآیند در یک **سیستم بسته** انجام می‌شود که احتمال آلودگی نمونه را به حداقل می‌رساند.

منبع:

• Cunningham SA, Mandrekar JN, Rosenblatt JE, Patel R. شناسایی سریع Mycoplasma hominis، Ureaplasma urealyticum و Ureaplasma parvum با روش PCR. Int J Bacteriol. 2013;2013:168742. doi:10.1155/2013/168742.

گزارش PDF:

• خیر

روزهای انجام آزمایش:

• دوشنبه تا جمعه

زمان آماده شدن گزارش:

• 3 تا 4 روز

مدت زمان نگهداری نمونه:

• 7 روز

محل انجام آزمایش:

• روچستر

هزینه‌ها:

• کاربران مجاز می‌توانند با ورود به Test Prices اطلاعات دقیق هزینه‌ها را مشاهده کنند.
• مشتریانی که به Test Prices دسترسی ندارند، می‌توانند به‌صورت ۲۴ ساعته، ۷ روز هفته با خدمات مشتریان تماس بگیرند.
• مشتریان بالقوه باید با نماینده حساب کاربری خود تماس بگیرند. برای دریافت کمک، با خدمات مشتریان تماس بگیرید.

دسته‌بندی آزمایش:

• این آزمایش توسط Mayo Clinic توسعه یافته و ویژگی‌های عملکردی آن مطابق با استانداردهای CLIA تعیین شده است.
• این تست هنوز توسط سازمان غذا و داروی ایالات متحده (FDA) تأیید نشده است.

اطلاعات کد CPT:

• 87798

اطلاعات LOINC®:

شناسه آزمایش	نام آزمایش	مقدار LOINC سفارش
MHRP	مایکوپلاسما هومینیس PCR	68546-1

شناسه نتیجه	نام نتیجه آزمایش	مقدار LOINC نتیجه
SRC86	منبع نمونه	31208-2
32536	مایکوپلاسما هومینیس PCR	68546-1

منابع تنظیم آزمایش:

• فایل‌های تنظیم:
  • Excel
  • Pdf

نمونه گزارش‌ها:

• گزارش‌های نرمال
• گزارش‌های غیرنرمال