آزمایش Human Papillomavirus (HPV) DNA Detection with Genotyping, High-Risk Types by PCR, ThinPrep, Varies

نوع نمونه: متغیر راهنمای سفارش:

• برای نمونه‌های واژینال، آزمایش VHPV / تشخیص ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) در نمونه واژینال با ژنوتیپ‌گیری برای انواع پرخطر با روش PCR را سفارش دهید.

اطلاعات ضروری:

• مشخص کردن **منبع نمونه** (سرویکس، بیوپسی دهانه رحم، اندوسرویکس، یا ترکیب سرویکس/اندوسرویکس) الزامی است.
• تاریخ جمع‌آوری نمونه و اطلاعات شناسایی بیمار الزامی است.

سوالات متداول سفارش:

کد سوال	توضیح	پاسخ‌ها
SS017	منبع نمونه	سرویکس، بیوپسی دهانه رحم، اندوسرویکس، سرویکس / اندوسرویکس

نمونه مورد نیاز:

• نوع نمونه: سرویکال (اندوسرویکال یا اکتوسرویکال)
• لوله/ظرف جمع‌آوری: ویال محلول ThinPrep/PreservCyt
• حجم نمونه: ۳ میلی‌لیتر از محلول در ویال ThinPrep/PreservCyt

دستورالعمل جمع‌آوری:

1. نمونه‌های ThinPrep را **به‌صورت جداگانه در کیسه قرار دهید**، زیرا این نمونه‌ها ممکن است هنگام حمل و نقل دچار نشتی شوند.
2. برچسب‌گذاری را **هم روی ویال و هم روی کیسه** انجام دهید.

فرم‌ها: اگر سفارش الکترونیکی ثبت نمی‌شود، فرم **درخواست آزمایش‌های میکروبیولوژی (T244)** را تکمیل، چاپ و همراه با نمونه ارسال کنید. حداقل حجم نمونه: ۱ میلی‌لیتر شرایط رد نمونه:

نوع نمونه	وضعیت رد
نمونه حاوی محلول نگهدارنده CytoRich Red	رد

پایداری نمونه:

نوع نمونه	دمای نگهداری	مدت زمان	ظرف ویژه
متغیر	دمای محیط (ترجیحی)	۴۲ روز	–
متغیر	یخچالی	۴۲ روز	–

کاربرد:

• تشخیص ژنوتیپ‌های پرخطر HR ویروس پاپیلومای انسانی HPV که با توسعه سرطان دهانه رحم مرتبط هستند.
• کمک به طبقه‌بندی زنان با نتایج غیرطبیعی تست پاپ اسمیر.
• تعیین ژنوتیپ اختصاصی HPV-16 و HPV-18 در صورت حضور.
• نتایج ژنوتیپ HPV-16 و HPV-18 می‌تواند به طبقه‌بندی زنان با نتیجه مثبت HPV پرخطر اما پاپ اسمیر منفی کمک کند.

اطلاعات بالینی: عفونت مداوم با ویروس پاپیلومای انسانی HPV علت اصلی سرطان دهانه رحم است. بیش از ۹۹ درصد از سرطان‌های دهانه رحم، شامل کارسینوم سلول سنگفرشی دهانه رحم و آدنوکارسینوم دهانه رحم، با HPV ارتباط دارند. قبل از توسعه سرطان مهاجم، ویروس سلول‌های مخاطی سنگفرشی و یا سلول‌های غده‌ای اندوسرویکس را آلوده می‌کند که می‌تواند منجر به تغییرات مورفولوژیکی شود. زمانی که این تغییرات محدود به موقعیت آناتومیکی طبیعی خود هستند، به عنوان نئوپلازی داخل اپیتلیالی دهانه رحم CIN شناخته می‌شوند. انواع پرخطر HPV مرتبط با سرطان دهانه رحم:

• برخی ژنوتیپ‌های HPV از جمله 16، 18، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 56، 58، 59، 66 و 68 به عنوان انواع پرخطر شناخته شده‌اند.
• HPV-16 مسئول تقریباً ۶۰ درصد از کل سرطان‌های دهانه رحم است.
• HPV-18 حدود ۱۰ تا ۱۵ درصد از سرطان‌های دهانه رحم را شامل می‌شود.

نقش آزمایش PCR در غربالگری:

• افزایش حساسیت برنامه‌های غربالگری سرطان دهانه رحم از طریق شناسایی زودهنگام ضایعات پرخطر در زنان ۳۰ ساله و بالاتر.
• کاهش نیاز به کولپوسکوپی و درمان‌های غیرضروری در بیماران ۲۱ ساله و بالاتر که نتیجه پاپ اسمیر آنها سلول‌های سنگفرشی غیرمعمول با اهمیت نامشخص ASC-US را نشان می‌دهد.
• تشخیص زودهنگام برای تعیین مسیر مناسب مدیریت بیماران.

مقادیر مرجع: نتیجه منفی برای ویروس پاپیلومای انسانی HPV ژنوتیپ‌های 16، 18، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 56، 58، 59، 66 و 68. تفسیر نتایج:

• نتیجه مثبت نشان‌دهنده حضور DNA ویروس پاپیلومای انسانی HPV از یک یا چند ژنوتیپ پرخطر است.
• نتیجه منفی نشان‌دهنده عدم حضور DNA HPV از ژنوتیپ‌های هدف است.
• در زنان ۲۵ ساله و بالاتر که نتیجه پاپ اسمیر آنها منفی است اما تست HPV-16 و یا HPV-18 مثبت است، در صورت لزوم ارجاع به کولپوسکوپی توصیه می‌شود.

هشدارها:

• آزمایش cobas HPV برای نمونه‌های سرویکال و اندوسرویکال جمع‌آوری‌شده در محلول PreservCyt ThinPrep تأیید شده است.
• این آزمایش فقط DNA ژنوتیپ‌های پرخطر HPV را تشخیص می‌دهد و انواع کم‌خطر مانند 6، 11، 42، 43 و 44 را شناسایی نمی‌کند.
• وجود ویروس HPV نشان‌دهنده ضایعات داخل اپیتلیالی سنگفرشی با درجه بالا HSIL یا نئوپلازی پیشرفته نیست و به این معنی نیست که سرطان دهانه رحم ایجاد خواهد شد.
• نتیجه HPV منفی لزوماً احتمال توسعه HSIL، CIN2-3 یا سرطان را رد نمی‌کند.
• میزان بالای خون در نمونه‌ها ممکن است باعث نتیجه منفی کاذب شود.

منابع بالینی:

• Saslow D, Solomon D, Lawson HW, et al. راهنمای غربالگری سرطان دهانه رحم. J Low Genit Tract Dis. 2012;16(3):175-204.
• Walboomers JM, Jacobs MV, Manos MM, et al. ویروس پاپیلومای انسانی عامل ضروری سرطان دهانه رحم. J Pathol. 1999;189(1):12-19.
• de Sanjose S, Quint WG, Alemany L, et al. ارتباط ژنوتیپ HPV با سرطان مهاجم دهانه رحم. Lancet Oncol. 2010;11(11):1048-1056.
• Wright TC Jr, Stoler MH, Sharma A, et al. ارزیابی ژنوتیپ HPV-16 و HPV-18 برای دسته‌بندی بیماران با HPV پرخطر و تست سیتولوژی منفی. Am J Clin Pathol. 2011;136(4):578-586.

توضیحات روش: آزمایش cobas HPV یک تست کیفی Real-Time PCR است که ۱۴ ژنوتیپ پرخطر ویروس پاپیلومای انسانی HPV را شناسایی می‌کند. این تست از پرایمرهایی برای تعیین یک توالی تقریباً ۲۰۰ نوکلئوتیدی در ناحیه پلی‌مورفیک L1 از ژنوم HPV استفاده می‌کند. در این روش، **مخلوط مستر** حاوی مجموعه‌ای از پرایمرهای اختصاصی است که برای تکثیر DNA ویروس HPV از **۱۴ ژنوتیپ پرخطر** شامل موارد زیر طراحی شده است:

• 16، 18، 31، 33، 35، 39، 45، 51، 52، 56، 58، 59، 66 و 68

یک جفت پرایمر اضافی نیز به‌عنوان **کنترل داخلی** برای هدف قرار دادن **ژن بتا-گلوبین انسانی** (با آمپلیکون ۳۳۰ جفت باز) در نظر گرفته شده است تا کل فرآیند آماده‌سازی نمونه و تکثیر PCR تحت نظارت قرار گیرد. **مکانیزم عملکرد تست:**

• پروب‌های الیگونوکلئوتیدی فلورسنت به نواحی پلی‌مورفیک در توالی تعریف‌شده توسط این پرایمرها متصل می‌شوند.
• تست از **کنترل مثبت با تیتر پایین** و **کنترل منفی** استفاده می‌کند.

(منبع: دستورالعمل بسته‌بندی تست cobas HPV برای سیستم‌های cobas 6800/8800، Roche Diagnostics, Inc; نسخه ۲.۰، ۰۳/۲۰۲۱) گزارش PDF: خیر روزهای انجام آزمایش: دوشنبه تا شنبه مدت زمان آماده‌سازی گزارش: ۳ تا ۶ روز مدت نگهداری نمونه: ۲ هفته محل انجام آزمایش: روچستر

هزینه‌ها: کاربران مجاز می‌توانند با ورود به Test Prices اطلاعات دقیق مربوط به هزینه را مشاهده کنند. مشتریانی که به Test Prices دسترسی ندارند، می‌توانند به‌صورت **۲۴ ساعته و ۷ روز هفته** با خدمات مشتریان تماس بگیرند. مشتریان جدید می‌توانند با نماینده حساب خود تماس بگیرند. برای دریافت راهنمایی، با بخش خدمات مشتریان تماس بگیرید. طبقه‌بندی آزمایش: این تست توسط **سازمان غذا و داروی آمریکا (FDA)** تأیید شده یا از الزامات آن معاف است و مطابق با دستورالعمل سازنده انجام می‌شود. ویژگی‌های عملکردی این تست توسط **کلینیک مایو** و مطابق با الزامات **CLIA** تأیید شده است. کد CPT:

• 87626
• G0476 (در صورت لزوم)

اطلاعات LOINC®:

کد تست	نام سفارش تست	کد LOINC سفارش
HPV	HPV with Genotyping, PCR, ThinPrep	71432-9

اطلاعات نتایج:

کد نتیجه	نام نتیجه آزمایش	کد LOINC نتیجه
SS017	منبع نمونه	31208-2
35924	HPV نوع 16 پرخطر، PCR	77399-4
35925	HPV نوع 18 پرخطر، PCR	77400-0
35926	سایر انواع پرخطر HPV، PCR	71431-1

منابع تنظیم آزمایش: فایل‌های تنظیم: دانلود فایل اکسل | دانلود فایل PDF نمونه گزارش‌ها: گزارش‌های نرمال | گزارش‌های غیرنرمال