آزمایش Enterovirus, Molecular Detection, PCR, Plasma

- کمک به تشخیص عفونتهای انتروویروسی با استفاده از نمونههای پلاسما
- این آزمایش نباید برای غربالگری بیماران بدون علائم استفاده شود.
واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) بلادرنگ / هیبریداسیون کاوشگر RNA
نام گزارش:Enterovirus PCR, P
نامهای دیگر:- کوکساکیویروس
- کوکساکیویروس A
- کوکساکیویروس B
- اکوویروس
- انتروویروس
- انتروویروس (کوکساکیویروس و اکوویروس)
- بیماری دست، پا و دهان
پلاسما EDTA
راهنمای سفارش:- این آزمایش قادر به شناسایی انتروویروس است اما امکان تفکیک ویروسهای این خانواده یا ارائه اطلاعات سرولوژیک را ندارد.
- شرایط ارسال: نمونه بالینی خام (فرهنگ کشت شده نباشد)
- لوله جمعآوری: درپوش بنفش (EDTA)
- لوله ارسال: ظرف استریل با درپیچ محکم
- حجم نمونه: ۱ میلیلیتر
- دستورالعمل جمعآوری: لوله خونگیری را سانتریفیوژ کرده و پلاسما را به ویال پلاستیکی انتقال دهید.
در صورت عدم سفارش الکترونیکی، فرم درخواست آزمایش میکروبیولوژی (T244) را تکمیل و همراه نمونه ارسال کنید.
حداقل حجم نمونه:0.3 میلیلیتر
شرایط رد نمونه:- همولیز شدید: رد
نوع نمونه | دمای نگهداری | مدت زمان | ظرف مخصوص |
---|---|---|---|
پلاسما EDTA | یخچالی (ترجیحی) | ۷ روز | — |
پلاسما EDTA | منجمد | ۷ روز | — |
- کمک به تشخیص عفونتهای انتروویروسی با استفاده از نمونههای پلاسما
- این آزمایش نباید برای غربالگری بیماران بدون علائم استفاده شود.
انتروویروسها از گروه ویروسهای RNA مثبت در خانواده Picornaviridae هستند که شامل ویروسهای پولیو، کوکساکیویروس، و اکوویروس میباشند. این ویروسها معمولاً در دستگاه گوارش تکثیر میشوند اما ممکن است باعث بروز بیماریهای سیستمیک مانند مننژیت آسپتیک، میوکاردیت، و فلج حاد شوند.
مقادیر مرجع:نتیجه منفی
تفسیر نتایج:- نتیجه مثبت: نشاندهنده حضور RNA انتروویروس در نمونه است.
- نتیجه منفی: احتمال عفونت انتروویروسی را به طور کامل رد نمیکند.
- نتایج باید همراه با تاریخچه بالینی بیمار تفسیر شود.
- این آزمایش نباید برای بیماران بدون علائم بالینی استفاده شود.
- مقایسه با روش کشت سلولی نشان داد که روش PCR سریعتر و حساستر است.
- محدوده قابل گزارش شامل نتایج کیفی مثبت یا منفی برای RNA انتروویروس است.
- Harvala H, Broberg E, Benschop K, et al: Recommendations for enterovirus diagnostics and characterisation within and beyond Europe. J Clin Virol. 2018 Apr;101:11-17
- Khetsuriani N, Lamonte-Fowlkes A, Oberst S, et al: Enterovirus surveillance-United States, 1970-2005. MMWR Surveill Summ, 2006 Sep 15;55(8):1-20
- Foray S, Pailloud F, Thouvenot D, Floret D, Aymard M, Lina B: Evaluation of combining upper respiratory tract swab samples with cerebrospinal fluid examination for the diagnosis of enteroviral meningitis in children. J Med Virol. 1999 Feb;57(2):193-197
این آزمایش با استفاده از تکنیک واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) معکوس بلادرنگ برای شناسایی اسید نوکلئیک ویروسی انجام میشود. در ابتدا، RNA ویروسی از نمونهها با استفاده از دستگاه خودکار MagNA Pure (Roche Applied Science) استخراج شده و سپس توسط دستگاه LightCycler 2.0 شرکت Roche تقویت و شناسایی میشود. این آزمایش برای شناسایی یک توالی هدف در ناحیه پلیپروتئین بهینهسازی شده است.
در این روش، RNA ژنومی انتروویروس ابتدا به DNA مکمل (cDNA) توسط آنزیم ترانسکریپتاز معکوس تبدیل میشود و سپس محصول cDNA تقویت میگردد. دستگاه LightCycler به سرعت (در حدود ۳۰-۴۰ دقیقه) فرآیند آمپلیکون را از طریق کنترل دقیق دمایی تشخیص میدهد.
شناسایی محصولات تقویت شده بر اساس اصل انتقال انرژی تشدید فلورسانس (FRET) انجام میشود. در این روش، یک پروب با فلوروفور دهنده فلوروسین در انتهای ۳’ و یک پروب دیگر با فلوروفور گیرنده LC-Red 640 در انتهای ۵’ استفاده میشود. وقتی پروبها به توالی هدف متصل شوند، نور با طول موج متفاوتی منتشر میشود که متناسب با میزان محصول PCR خاص است.
تحلیل منحنی ذوب:بعد از تکثیر PCR، تحلیل منحنی ذوب انجام میشود که حساسیت بالایی را نسبت به مرحله تقویت حفظ کرده و از دقت بالایی برخوردار است. در این مرحله، دمای محفظه حرارتی بهآرامی از ۴۵ درجه سانتیگراد تا ۸۰ درجه سانتیگراد افزایش یافته و میزان فلورسانس در فواصل متوالی اندازهگیری میشود. نقطهای که در آن ۵۰٪ فلورسانس از بین میرود بهعنوان دمای ذوب (Tm) تعیین میشود.
گزارش PDF:خیر
روزهای انجام آزمایش:دوشنبه تا یکشنبه
مدت زمان آمادهسازی گزارش:همان روز / ۱ تا ۵ روز
مدت نگهداری نمونه:۱ هفته
محل انجام آزمایش:روچستر
کاربران مجاز میتوانند با ورود به بخش قیمت آزمایشها، اطلاعات دقیق هزینه را مشاهده کنند. مشتریانی که دسترسی به قیمتها ندارند میتوانند ۲۴ ساعت شبانهروز و ۷ روز هفته با خدمات مشتری تماس بگیرند. مشتریان بالقوه باید با نماینده حساب کاربری خود تماس بگیرند. برای دریافت راهنمایی، با خدمات مشتری تماس بگیرید.
طبقهبندی آزمایش:این آزمایش توسط کلینیک Mayo توسعه یافته و ویژگیهای عملکرد آن مطابق با الزامات CLIA تعیین شده است. این آزمایش توسط سازمان غذا و داروی ایالات متحده (FDA) تایید یا تصویب نشده است.
اطلاعات کد CPT:- 87498
شناسه آزمایش | نام آزمایش | مقدار LOINC سفارش |
---|---|---|
ENTP | آزمایش PCR انتروویروس، پلاسما | 97151-5 |
56068 | آزمایش PCR انتروویروس، پلاسما | 97151-5 |